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después, se añadieron 50 \mul por pocillo de medio de cultivo M199 suplementado con FBS al 1% y una muestra de VEGF-E (a diluciones de 1%, 0,1% y 0,01%, respectivamente) conjuntamente con pigmento 6-FAM-FITC 1 \muM para teñir vacuolas durante la formación de las mismas. Las células se incubaron a 37ºC/5% de CO_{2} durante 48 horas, se fijaron con 3,7% de formalina a temperatura ambiente durante 10 horas, se lavaron con PBS cinco veces, después se tiñeron con Rh-faloidina a 4ºC durante la noche seguido de la tinción nuclear con DAPI 4 \muM.

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